Tema: Clonación, purificación, cristalización y estudios de rayos X de SPD0280 (regulador transcripcional de Streptococcus neumoniae D39)
Objetivo: Detectar al Streptococcus neumoniae SPD0280, determinar su estructura y definir su relación con la virulencia de S. neumoniae
Gen: Secuencia para Streptococcus neumoniae SPD0280 (5–495 aminoácidos)
Enzimas de restricción: BamHI y XhoI.
Enzimas de ligación: Ligasa T4
Vector: Plásmido bacteriano (pET-28a)
Célula Reproductora: Escherichia coli BL21
MTG: Transformación
MIC: PCR, cultivo bacteriano, purificación, sedimentación, cristalización, difracción con rayos X, método SAD y MAD (dispersión anómala múltiple de la longitud de onda)
ADN Recombinante Natural
Las primeras vacunas efectivas contra el streptococcus neumoniae es una de las intervenciones clínicas generaron una presión de selección que condujo a la evolución de mutantes y cepas de escape de vacunas que eran altamente resistentes a los antibióticos. La notable capacidad de S. pneumoniae para adquirir resistencia a los medicamentos y evadir la presión de la vacuna se debe a su plasticidad genética mediada por recombinación. S.pneumoniae es competente para la transformación genética natural , una propiedad que permite al neumococo adquirir nuevos rasgos al absorber el ADN desnudo del entorno e incorporarlo en su genoma mediante recombinación homóloga.
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